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he染色步骤权威发布_全自动he染色技术诊断能查出什么(2024年12月精准访谈)

内容来源：友软网络所属栏目：观点更新日期：2024-12-02

he染色步骤

𐟔줼Š红染色：探索细胞世界的色彩奥秘𐟌ˆ 𐟌𑤼Š红染色，也称为苏木精-伊红染色，是病理学中一项基础且广泛使用的技术。它通过赋予细胞核和细胞质不同的颜色，帮助病理学家做出精确的诊断。苏木精染液呈碱性，主要将细胞核内的染色质和胞质内的核糖体染成紫蓝色；而伊红染液则呈酸性，将细胞质和细胞外基质染成红色。 𐟔숅染色步骤概览：取材固定：确保组织样本的完整性。脱水透明：去除水分，使组织更透明。浸蜡包埋：将组织固定在蜡块中，便于切片。切片与贴片：将蜡块切成薄片，并粘贴在载玻片上。脱蜡染色：去除蜡块，用伊红和苏木精染色。再次脱水透明：确保染色后的组织清晰。封固：用中性树胶封固切片，防止褪色。显微镜镜检：最后一步，通过显微镜观察染色后的细胞结构。 𐟓橀样运输要求：样本需在20倍样本体积的固定液中固定至少24小时。常温运输，避免冷冻结冰。 𐟒ህ染色服务内容：包埋：将组织固定在蜡块中。切片：将蜡块切成薄片。染色：用伊红和苏木精染色。拍照：记录染色后的细胞结构。 𐟔通过HE染色，病理学家能够更准确地评估细胞的形态和结构，从而做出更精确的诊断。这项技术不仅在病理学中至关重要，也在组织学、胚胎学等研究领域广泛应用。

𐟔젧Ÿ𓨜᥈‡片HE染色全攻略：步骤与技巧苏木精-伊红染色法（Hematoxylin-Eosin staining），简称HE染色法，是切片技术中常用的染色方法之一。苏木精染液为碱性，主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色；伊红为酸性染料，主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。 𐟧ꠥꌦ�꤯𜚊取样固定取新鲜的组织样品，加入4%多聚甲醛组织固定液的EP管中。取样材料应该小而薄，约黄豆粒大小。脱水采用梯度酒精浓度法脱水。通常选择50%-60%-70%-90%-95%-100%的浓度梯度，各酒精浓度要求准确。95%以前各步骤脱水1小时，95%和100%均分为两步进行，分别脱水30分钟。实验中常将组织在后一步的95%的酒精溶液中过夜，以便进行脱脂。透明浸蜡为了使石蜡更容易进入组织，要对脱水后的组织进行透明处理。将组织依次浸入二甲苯:无水乙醇(1:1)溶液和二甲苯透明样品各30分钟，然后在60℃的石蜡溶液中充分浸泡2小时。包埋和切片通过包埋机，将浸泡后的组织块使用蜡液包埋后，放到冷台上凝固。之后使用刀片进行修整，在切片机上固定好后进行连续切片（5um）。所得的切片用银子在42℃温水中展开，之后固定在载玻片上，经40Ⰳ烘干后进行HE染色。 HE染色 HE染色的程序如下：浸入二甲苯ⅠⅡ，95%酒精，90%酒精，80%酒精，70%酒精各15分钟。二甲苯:100%酒精(1:1)，100%酒精Ⅰ，50%酒精，蒸馏水各2分钟。苏木精染液5-10分钟，水洗后分化入1%盐酸酒精5秒，自来水10分钟。 1%氨水蓝化，自来水，50%，70%，80%，90%和95%酒精各2分钟。伊红染液5分钟，95%酒精，100%酒精ⅠⅡ，100%酒精:二甲苯(1:1)，二甲苯I、各2分钟。中性树脂封片，不应该等切片上的二甲苯干了再封固。通过以上步骤，即可完成HE染色，观察到细胞核和细胞质的清晰染色效果。

𐟧쨋木精伊红染色法全解析𐟔 𐟒‰ 苏木精-伊红染色法，简称HE染色，是生物医学中常用的染色技术。 𐟔젩€š过HE染色，我们可以清晰地观察到细胞的结构和分布。 𐟒ᠦŸ“色原理： 𐟔𙠨‹木精染液呈碱性，主要将细胞核内的染色质与胞质内的核糖体染成紫蓝色。 𐟔𘠤𜊧𚢦Ÿ“液呈酸性，可使细胞质和细胞外基质染成红色。 𐟒‰ 以心脏组织为例，HE染色的步骤如下： 1️⃣ 取材与固定：取出心脏，用预冷的PBS冲洗，然后放入4%多聚甲醛中固定24小时以上。 2️⃣ 脱水与包埋：通过梯度脱水，使用乙醇、二甲苯和石蜡进行脱水处理，然后包埋在石蜡中。 3️⃣ 切片：将包埋好的组织切成5微米厚的切片，并黏附在载玻片上。 4️⃣ 脱蜡与染色：通过一系列的脱蜡步骤，然后使用苏木精和伊红进行染色。 5️⃣ 后处理：脱水、透化，并使用中性树脂封片。 𐟓 注意事项： ⚠️ 若苏木素染过深，可用盐酸分化使颜色变淡。 ⚠️ 若伊红过染，可用70%乙醇洗涤以使颜色变淡。 ⚠️ 染色后应立即封片，避免长时间暴露于空气中导致变黑。 𐟔젩€š过这些步骤，我们可以得到一张清晰的HE染色切片，为生物医学研究提供宝贵的视觉资料。

大鼠膝关节组织HE染色全流程详解 𐟐�. 脱钙将大鼠膝关节软骨组织固定在4%多聚甲醛溶液中至少48小时。然后，将组织从固定液中取出，放入EDTA脱钙液中浸泡，脱钙时间大约为4周。 𐟒砲. 脱水将脱钙后的组织从脱钙液中取出，放入脱水机内，依次通过梯度乙醇进行脱水。具体步骤如下：75%乙醇4小时→85%乙醇2小时→90%乙醇2小时→95%乙醇1小时→无水乙醇30分钟→无水乙醇30分钟→醇苯10分钟→二甲苯I 10分钟→二甲苯II 10分钟→石蜡I 1小时→石蜡II 1小时→石蜡III 1小时。 𐟓栳. 包埋将融化的石蜡放入包埋框，在石蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出，按照包埋要求放入包埋框，并贴上对应的标签信息。将包埋框置于-20℃的冷冻台上冷却，待蜡块凝固后，将其从包埋框中取出并修整。将包埋好的石蜡块放入4℃冰箱中定型，并根据后续实验要求确定好定型的时间。 𐟔꠴. 切片定型10小时后，从4℃冰箱中取出蜡块固定在切片机上，先粗调切厚度为1毫米的蜡片，确定好组织切面，再细调切成5微米的石蜡切片。将切好的切片用小镊子夹入到45℃恒温水中摊片，待切片摊开平整后，用载玻片将切片从水中捞出，待自然晾干后放于37℃烤箱烤干。 𐟎蠵. 染色烤干后从烤箱中取出，立即按照以下步骤进行HE染色：二甲苯I脱蜡5分钟→二甲苯II脱蜡5分钟→二甲苯III脱蜡5分钟→甲苯Ⅳ脱蜡5分钟→无水乙醇脱水5分钟→90%乙醇脱水5分钟→80%乙醇脱水5分钟→70%乙醇脱水5分钟→自来水洗涤3次（浸泡清洗，每次1分钟）→苏木素染色5～10分钟→自来水洗片3次，每次1分钟→1%盐酸酒精分化5～10秒→自来水水洗3次，每次1分钟→37℃恒温水浴箱中返蓝10分钟→伊红染色2～3分钟→自来水快速清洗→80%乙醇脱水10秒。 𐟔„ 6. 封片将染色完成的切片放入37℃烘干机进行干燥，干燥1小时后，从烘干箱中取出，使用中性树胶封片，应小心不要产生气泡。将切片放置于通风橱内，室温下自然晾干。 𐟓𘠷. 拍照在光学显微镜下观察各组大鼠膝关节软骨组织结构，并拍照记录。

𐟧쨋木精伊红染色法大揭秘𐟔 𐟔쨋木精伊红染色法，简称HE染色法，是石蜡切片技术中常用的染色方法之一哦！𐟒ኊ𐟌ˆ苏木精染液呈碱性，它能让细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着上紫蓝色的美丽色彩。而伊红染液则是酸性的，它主要负责让细胞质和细胞外基质中的成分染上鲜艳的红色。𐟒– 𐟓实验步骤来啦： 1️⃣ 取样固定：新鲜的组织样品要加入4%多聚甲醛组织固定液中，记得要小而薄，像黄豆粒大小就不错！ 2️⃣ 脱水处理：用梯度酒精浓度法来脱水，50%-60%-70%-90%-95%-100%，每一步都要脱水1小时哦！ 3️⃣ 透明浸蜡：为了让石蜡更容易进入组织，要对脱水后的组织进行透明处理，用二甲苯、无水乙醇等溶液浸泡。 4️⃣ 包埋切片：通过包埋机把组织包埋在蜡液里，然后切片成5微米厚的薄片。 5️⃣ HE染色：最后就是关键的HE染色步骤啦！把切片浸入各种浓度的酒精和蒸馏水中，再加入苏木精染液和伊红染液，就能得到美丽的染色结果啦！𐟎‰ 𐟒ᥰ贴士： * 固定时要确保组织在固定液中的位置，并随时翻动组织哦！ * 脱水过程中要保证脱水液体的浓度，并经常更换新溶液。 * 浸蜡、包埋和切片时都要尽量在恒温下操作，防止温度差造成的影响。 * 染色前切片脱蜡要彻底，这样才能得到更好的染色效果哦！𐟌Ÿ

细胞HE染色全攻略：从原理到步骤 ### 一、实验原理 𐟌ˆ 苏木素-伊红染色法（HE染色法）是细胞学中最经典的染色方法之一。它利用两种染料——碱性染料苏木素和酸性染料伊红，分别与细胞核和细胞质发生化学反应，从而在光镜下清晰地呈现出细胞的微细结构。这个过程既有化学反应，也有物理作用。从化学反应来看，组织细胞内含有酸性物质和碱性物质。细胞的酸性物质与碱性染料的阳离子结合，而细胞核的碱性物质与酸性染料的阴离子结合。因此，酸性细胞核被碱性的苏木素染成蓝色，而碱性的胞浆被酸性染料伊红染成红色。从物理现象来看，主要有吸附和吸收之说。HE染色提供良好的核浆对比染色，是细胞化学染色最常用的一种方法。二、实验用品 𐟧ꊥ›𚥮š液：常用95%乙醇和冰丙酮苏木精染液：称取苏木精粉0.5g，铵矾24g溶解于70ml蒸馏水中，然后取NaIO31g，水5ml，再加入甘油30ml和冰醋酸2ml，混合均匀，滤纸过滤，备用。伊红染液：称取0.5g水溶性伊红染液，溶于100ml蒸馏水中。稀盐酸乙醇溶液：用75%乙醇配制1%盐酸。系列浓度的乙醇、二甲苯、中性树胶。培养瓶、培养皿、眼科镊、盖玻片、载玻片、显微镜。三、实验步骤 𐟔슦 𗥓制备：对于贴壁生长细胞，胰酶消化，调整细胞浓度约1㗱05/ml，滴加于盖玻片上（置于6孔板中），培养相应时间后，取出细胞爬片，用PBS洗涤3次。样品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗涤2次，每次1min。染核：苏木素染液染色2-3min，自来水洗涤。分色：镜下观察，若细胞核染色过深，用1%盐酸酒精溶液分色数秒，自来水洗涤。染胞质：浸入伊红染液染色1min，自来水洗涤。吹干或自然晾干细胞爬片后，中性树胶封片。若细胞用4%多聚甲醛固定，则染色时间相应延长，苏木素染色12-15min，伊红5min即可。

𐟔찟窠物理实验的常用仪器与软件一览在基础物理实验室中，有许多常用的实验仪器和软件，帮助科学家们进行各种实验。以下是一些常见的实验方法和仪器：基因鉴定：包括DNA提取、PCR体系、电泳技术等，用于研究基因敲除鼠、基因敲入鼠和点突变鼠等。石蜡切片/冰冻切片：通过HE染色、免疫荧光和免疫组化等技术，观察细胞和组织结构。 qPCR：包括引物设计、RNA提取、逆转录和qPCR体系配置，用于定量分析基因表达。 Western blot (WB)：从组织样本中提取蛋白质，通过制胶、电泳、转膜、孵抗体和曝光等步骤，检测蛋白质表达。 Elisa：用于微量蛋白或物质的定量分析。细胞实验：包括细胞复苏、培养、传代、冻存、计数、转染以及细胞增殖/毒性实验、迁移实验、成管实验、免疫荧光染色、流式细胞术、细胞能量代谢实验、细胞周期检测实验和细胞凋亡实验等。常用仪器：如离心机、涡旋混匀仪、普通显微镜、荧光显微镜、共聚焦显微镜、酶标仪、PCR仪、荧光定量PCR仪、流式细胞仪和海马仪等。常用软件：包括统计软件如ImageJ、GraphPad Prism和SPSS，文献管理软件如EndNote和Zotero，绘图软件如Draw.io和PS，以及引物设计软件如Primer Premier 5和SnapGene。通过这些仪器和软件，科学家们可以进行各种物理实验，探索自然界的奥秘。

提高HE染色成功率的实用技巧！嘿，大家好！今天我想和大家分享一些关于提高HE染色成功率的小技巧。虽然这些技巧看起来很简单，但它们真的能帮助你在实验中避免很多麻烦。下面就让我来详细说说吧！脱蜡前的准备工作 𐟧𔊩斥…ˆ，脱蜡这一步非常关键。在脱蜡前，一定要检查你的环保型脱蜡透明液是否足够，能不能完全浸泡到组织，颜色是否清亮。这样才能保证脱蜡的效果，否则后续步骤都会受到影响。苏木素和伊红的效价 𐟒‰ 苏木素和伊红的效价也是需要注意的。这两种染液的效价会随着时间的推移而降低，导致染色不均匀或者出现斑点。所以，记得及时更换染液，避免这种情况发生。染液试剂的保存 𐟧Š 使用完染液试剂后，一定要密封保存，防止有效成分挥发。当你发现样本组织着色明显偏浅或者颜色异常时，可以考虑换新的染液了。毕竟，细节决定成败嘛！分化的观察 𐟑€ 在分化步骤中，要认真观察切片。当切片由深蓝变粉红时，立即将切片移入准备好的流水中终止分化。这一步非常关键，观察不仔细可能会导致染色失败。彻底冲洗 𐟚🊥ˆ†化步骤后的每一步都要彻底冲洗，避免分化不充分导致的染色异常问题。这一步虽然看起来简单，但非常重要。无水乙醇的纯度 𐟍𖊤𜊧𚢦Ÿ“色后脱水的无水乙醇需要大于99.9%。如果乙醇含水，伊红会褪色，导致染色不均匀。所以，一定要用高纯度的乙醇。封片的技巧 𐟓œ 最后一步是封片。让盖玻片与载玻片成45Ⱘ璯𜌤𝿧›–玻片慢慢接触中性树胶，完成后用镊子轻轻按压盖玻片，驱赶气泡。这一步虽然简单，但做不好会影响整体效果。个人防护 𐟛᯸ 当然啦，实验时记得穿好白大褂，戴好口罩和一次性手套。个人防护非常重要，毕竟安全第一嘛！希望这些小技巧能帮到大家，祝大家实验顺利！如果有其他问题或者经验分享，欢迎在评论区留言哦！𐟘Š

𐟔젧Ÿ𓨜᥈‡片HE染色全攻略 𐟌ˆ 𐟓Œ 组织包埋步骤：乙醇脱水：将组织依次浸泡在70%、80%、90%、95%、100%的乙醇中，各40分钟。注意，骨性和钙化组织需在脱钙液中浸泡24小时。透明处理：将组织依次浸泡在三个二甲苯中，每缸各1小时。浸蜡：将组织依次浸泡在三个石蜡缸中，每缸各1小时。包埋：将液态石蜡倒入模具盒中，将浸好蜡的组织块平放底部，切面朝下。待石蜡凝固后去掉包埋框，完全冷却后修整蜡块。 𐟔ꠥˆ‡片制作：将预冷的蜡块固定在切片机上，调节切片厚度为4，切成厚度均匀的切片。用毛笔轻轻托起切片，放入展片箱中，水温控制在45℃左右。待切片摊平整后捞片，贴附至载玻片上，放置在65℃烤片机上烤1小时，再放入烘箱内烘烤2小时。 𐟌ˆ 石蜡切片脱蜡：将石蜡切片依次放入二甲苯Ⅰ10分钟、二甲苯Ⅱ10分钟、二甲苯Ⅲ10分钟、无水乙醇Ⅰ5分钟、无水乙醇Ⅱ5分钟、90%酒精5分钟、80%酒精5分钟、70%酒精5分钟、50%酒精5分钟。 𐟎蠈E染色：石蜡切片入苏木素染0.5-1分钟，自来水漂洗。 1%盐酸酒精分化数秒，自来水漂洗。 1%氨水水溶液返蓝1分钟，流水冲洗数秒。放入伊红染液中染色数秒，流水漂洗。 𐟒砨„𑦰𔥰片：石蜡切片依次放入75%乙醇2分钟、85%乙醇2分钟、无水乙醇5分钟、无水乙醇5分钟、二甲苯5分钟透明。将切片从二甲苯中取出，中性树胶封片。 𐟔 结果判读：细胞核为蓝色，细胞质为红色。

𐟧젧Ÿ𓨜᥈‡片HE染色实验全攻略 𐟓– 𐟔젧𛄧𛇥Œ…埋步骤：乙醇脱水：将组织依次浸泡在70%、80%、90%、95%和100%的乙醇中，各40分钟。注意，骨性和钙化组织需在脱钙液中浸泡24小时。透明处理：将组织依次浸泡在三个二甲苯中，各1小时。浸蜡：将组织依次浸泡在三个石蜡缸中，各1小时。包埋：将液态石蜡倒入模具盒中，将浸好蜡的组织块平放底部，切面朝下，待石蜡凝固后去掉包埋框，完全冷却后修整蜡块。 𐟔ꠥˆ‡片制作：将预冷的蜡块固定在石蜡切片机上，使蜡块的切面与刀口平行，刀的倾斜度通常为15度。调节切片厚度为4微米，切成厚度均匀的切片。用毛笔轻轻托起切片，放入展片箱中，水温控制在45度左右，待摊平整后捞片。将切片贴附在载玻片上，放置在65度的烤片机上烤1小时，再放入烘箱内烘烤2小时。 𐟌Š 石蜡切片脱蜡至水：将石蜡切片依次放入二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中各10分钟，再放入无水乙醇Ⅰ、Ⅱ中各5分钟，然后依次放入90%、80%、70%和50%的酒精中各5分钟进行梯度脱蜡。 𐟎蠈E染色：将石蜡切片放入苏木素染液中染色0.5-1分钟，自来水漂洗。用1%盐酸酒精分化数秒，自来水漂洗。用1%氨水返蓝1分钟，流水冲洗数秒。放入伊红染液中染色数秒，流水漂洗。 𐟔– 脱水封片：将石蜡切片依次放入75%和85%的乙醇中各2分钟，再放入无水乙醇中5分钟两次。将切片从二甲苯中取出，用中性树胶封片。 𐟔 结果判读：细胞核为蓝色，细胞质为红色。